杜鹃花植物组织技术要点

    597苗木网/2010年7月17日/讯:杜鹃花组织培养，通常使用的外植体为茎尖、茎节和花蕾等。因花蕾的分化较为困难，周期长；茎尖的取材受到一定限制，故国内多采用茎节为初代培养的外植体。

    杀菌处置时，杀菌能力较强的升汞（氯化汞）易造成外植体材料的褐变死亡，不宜使用。试验标明，采用饱和的次氯酸钙液上清液或5％的次氯酸钠液作为灭菌剂，效果较好，处置时间为15至20分钟。为加强灭菌效果，还可加入1％的克菌丹或0.1％的吐温－20山梨糖醇）配合使用。资料灭菌前的预处理，通常采用70％酒精浸泡，不超过30秒。此外，用中性洗涤剂进行材料的预处理，亦可有效降低其灭菌后的污染率。外植资料灭菌流程为：洗衣粉液浸泡20分钟?流水冲洗至清?70％酒精浸泡30秒?灭菌水冲洗1分钟?5％次氯酸钠浸泡15分钟,灭菌水漂洗3次，每次1分钟。如此，可将外植体污染率降低到15％以下。

    杜鹃花组培所用培养基，为Andeson改良MS培养基：将MS培养基中的硝酸铵和硝酸钾用量分别减至14取消了碘化钾成分，铁盐的用量增加一倍。因杜鹃花科植物原产于高山酸性土壤，培养基的pH值宜为5.0至5.4培养室温度25℃，光照强度3000勒克斯，光照时间12至14小时。

    杜鹃花在诱芽培养中使用的激素较一般植物有异，需要活性较强的细胞激动素类物质，才干达到满意的效果。试验标明，使用ZT诱芽效应最为显著；添加KT处置几乎无丛芽或侧芽发生，仅是原茎尖的伸长；而选用6BA 处置，则导致培养资料的褐变加剧，效果反不如对照。此外，其后的增殖培养中，杜鹃花对细胞激动素种类的要求，仍以添加ZT为好。

    国外在杜鹃花的组培中多使用2ip作为外源细胞激动素，效果较ZT好。但从经济的角度考虑，仍推荐使用ZT

2杜鹃花的初代和继代增殖培养

    杜鹃花初代诱芽培养，NA A 浓度不得超越0.1mgLZT用量的增大对诱芽效应有明显促进作用。但提高ZT浓度时，NA A 浓度不宜同步增加，ZTNA A 值较大为好。从经济培养的意义动身，初代培养的激素配比以ZT5＋NA A 0.01mgL为宜，培养1个月左右时，诱芽率即可达100％，诱芽系数6.5597MM